Activity

Extracción de ADN de células de epitelio bucal humano.

Characters:

Rosalind Elsie Franklin

Theme: Ácidos Nucleicos

Competencies

Mathematical competence in science, technology and engineering

Personal, social and learning to learn competence

Subjects and year by Educational System

Spain > Biology and geology > 4th ESO > Genetic and evolution

Enunciation

<img title="Women's Legacy logo" src="//inclusion.womenslegacyproject.eu/images/LogoWL.svg" /><hr />Rosalind Franklin ha pasado a la historia por ser la autora de la famosa fotograf&iacute;a 51. Una imagen de la mol&eacute;cula de ADN tomada con una t&eacute;cnica absolutamente novedosa en su &eacute;poca: la difracci&oacute;n de Rayos X. Como a&ntilde;os m&aacute;s tarde reconocieron tanto Watson como Crick, la visi&oacute;n de la imagen tomada por Rosalind Franklin, fue fundamental en el descubrimiento de la estructura del ADN.&nbsp; El ADN se encuentra en el n&uacute;cleo de las c&eacute;lulas, unido a prote&iacute;nas que reciben el nombre de histonas. Al conjunto ADN-prote&iacute;nas se le denomina cromatina. &nbsp; Hoy en d&iacute;a es muy habitual realizar distintos tipos de pruebas tanto en medicina forense como en cl&iacute;nica, para las cuales es necesario extraer el ADN de las c&eacute;lulas. Una vez extra&iacute;do, podemos comprobar si la secuencia gen&eacute;tica correspondiente a cierta enfermedad que nosotros buscamos est&aacute; presente o no, o bien si ciertas secuencias gen&eacute;ticas de la muestra coinciden o no con las presentes en una prueba policial (por ejemplo, restos de sangre, pelo o semen, recogidos en la escena del crimen).&nbsp; Cuando la extracci&oacute;n de ADN se hace en un laboratorio, ha de hacerse con mucho cuidado, para separar el ADN nuclear del resto de ADN (por ejemplo, ADN mitocondrial) que puede haber en la c&eacute;lula. Adem&aacute;s, ha de obtenerse lo m&aacute;s puro posible (es decir, libre de prote&iacute;nas etc.).&nbsp; Por otra parte, el ADN es muy l&aacute;bil, es decir, se rompe f&aacute;cilmente, tanto por m&eacute;todos f&iacute;sicos (agitaci&oacute;n brusca, etc.), como por m&eacute;todos qu&iacute;micos (presencia de Dnasas en las manos, por ejemplo) por lo que una de las normas b&aacute;sicas cuando se trabaja con ADN es usar guantes para que las Dnasas de las manos no rompan el ADN con el que trabajamos y ser muy cuidadoso en su manipulaci&oacute;n.&nbsp; Nosotros no vamos a tomar tantas precauciones, ya que no vamos a usar el ADN para secuenciarlo, etc., de modo que el resultado de nuestra extracci&oacute;n ser&aacute; un ADN muy contaminado y sucio, sin purificar; sin embargo, se ver&aacute; la hebra de ADN en el tubo de ensayo con lo que conseguiremos el objetivo de esta pr&aacute;ctica.&nbsp; &nbsp; Las c&eacute;lulas del epitelio bucal se desprenden f&aacute;cilmente con solo enjuagarte la boca, por lo que es una forma f&aacute;cil de obtener ADN procedente del n&uacute;cleo de dichas c&eacute;lulas.&nbsp; Romperemos los n&uacute;cleos de las mismas mediante una disoluci&oacute;n hipert&oacute;nica (con mucha sal) vaci&aacute;ndose su contenido en la disoluci&oacute;n. Como en los n&uacute;cleos de las c&eacute;lulas hay ARN, y prote&iacute;nas, entre otras cosas, intentaremos separar el ADN de otras sustancias en la medida de lo posible. Esto lo conseguiremos con el detergente.&nbsp;
 MATERIAL&nbsp; -Agua destilada.&nbsp; -Sal com&uacute;n.&nbsp; -Detergente l&iacute;quido o champ&uacute;.&nbsp; -Bicarbonato s&oacute;dico.&nbsp; -Alcohol et&iacute;lico de 96&ordm;.&nbsp; -C&eacute;lulas epiteliales.&nbsp;
  REALIZACI&Oacute;N&nbsp; 1.- Preparar un tamp&oacute;n con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un ba&ntilde;o de hielo triturado: &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;-120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo. &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;-1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;-5 g de bicarbonato s&oacute;dico. &nbsp; &nbsp; &nbsp; - 5 ml de detergente l&iacute;quido o champ&uacute;. &nbsp;
2.-Coge 15 ml de tamp&oacute;n y ponlo en un vaso&nbsp; 3.- Pon en la boca unos 20-25 ml de agua (una cucharada) y enju&aacute;gate bien, moviendo el agua de una mejilla a la otra. Escupe el agua en el vaso donde est&aacute; el tamp&oacute;n. &nbsp; 4.- Mueve ligeramente para que se mezclen ambas soluciones, pero sin agitar, para evitar la formaci&oacute;n de espuma&nbsp; 5.- Pipetea 15 ml de alcohol (debe estar fr&iacute;o. Si no lo est&aacute; puede no salir bien). El alcohol debe deslizarse cuidadosamente por las paredes del vaso. Esto es muy importante para que el ADN no se rompa.&nbsp; 6.- Mueve ligeramente el vaso hasta que veas que aparece un precipitado. El ADN no es soluble en alcohol, por lo que precipita en forma de &ldquo;hilos&rdquo; que pueden observarse a simple vista y recogerse con una varilla o un gancho.&nbsp;
CUESTIONES&nbsp; 1.- &iquest;Qu&eacute; aspecto tiene el ADN obtenido?&nbsp; 2.- &iquest;Para qu&eacute; hemos utilizado sal? Razona la respuesta.&nbsp; 3.- &iquest;Y el alcohol? Razona la respuesta.&nbsp; 4.- Busca informaci&oacute;n sobre Rosalind Franklin: &iquest;C&oacute;mo llegaron las im&aacute;genes del ADN a manos de Watson y Crick? &iquest;Reconocieron estos cient&iacute;ficos el trabajo realizado por Franklin? &iquest;Por qu&eacute; crees que fue as&iacute;?&nbsp; 5.- Escribe tus conclusiones.&nbsp;

Observations and context

Rosalind Franklin fue contemporánea de la nutricionista británica Elsi Widdowson y de la física austríaca LIsa Meitner.
Al igual que le sucedió a Mary Anning, paleontóloga inglesa que descubrió los primeros esqueletos de ictiosaurio, plesiosaurio, y coprolitos de dinosaurio, Rosalind tuvo muchas dificultades para investigar y publicar por el hecho de ser mujer. En ambos casos, sus compañeros masculinos utilizaron los hallazgos de ambas para alcanzar el éxito en sus investigaciones. En el caso de Mary Anning, no podía publicar sus hallazgos por ser mujer y su nombre aparecía siempre detrás de un nombre masculino. En el caso de Rosalind Franklin, su “fotografía” fue clave para el descubrimiento de la doble hélice, pero el reconocimiento fue para Watson y Crick, que recibieron el premio Nobel.

Description

Situación de aprendizaje. Se trata de una práctica de laboratorio. Es conveniente distribuir al alumnado en grupos de tres o cuatro personas para le realización de la actividad.
Objetivos:
-Obtener ADN de las células de la boca y observarlo.
-Acercarse a la forma de trabajo en un laboratorio de biología molecular.
-Aprender a hacer disoluciones.
-Comprender que la actividad científica es una actividad humana en un contexto social, en el que pueden suceder cosas como lo ocurrido a Rosalind Franklin.
Competencias específicas: CE1, CE3, CE4, CE7
Temporalización: Una sesión para realizar la práctica y otra (también puede realizarla el alumnado en casa), para responder a las preguntas propuestas.
Espacios/Recursos necesarios: Laboratorio de Biología. Material de laboratorio indicado en el guión de la práctica.
Criterios de evaluación:
-Ser capaz de seguir las pautas indicadas en el guion para obtener resultados
-Medir correctamente volúmenes y realizar los cálculos necesarios.
-Utilizar de forma adecuada el material de laboratorio
-Argumentar conclusiones de forma coherente utilizando un lenguaje apropiado
Evaluación Curricular del alumnado:
El alumnado será evaluado, por una parte, en base a una Rúbrica de autoevaluación y por otra, según la diligencia en la ejecución de la práctica y atendiendo a la pertinencia de las respuestas ofrecidas. La evaluación será grupal, si se ha decidido organizar la actividad en grupos.

Extracción de ADN de células de epitelio bucal humano.

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Observations and context

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